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Revista Científica Zambos
ISSN: 3028-8843
Vol. 4 - Núm. 3 / Septiembre Diciembre 2025
Revista Científica Zambos / Vol. 04 / Num. 03/ www. revistaczambos.utelvtsd.edu.ec
Optimización de la extracción de polifenoles totales
en hojas de Psidium guajava
Optimization of the extraction of total polyphenols from Psidium
guajava leaves
Viáfara-Banguera, Derwin
1
Reyes-Mera, Jorge Julio
2
https://orcid.org/0000-0003-1376-1231
https://orcid.org/0000-0001-6435-0649
dviafara@uea.edu.ec
jreyes@uea.edu.ec
Ecuador, Puyo, Universidad Estatal Amazónica
Ecuador, Puyo, Universidad Estatal Amazónica
Paredes-Ulloa, Christopher Oswaldo
3
Caicedo-Quinche, Willam Orlando
4
https://orcid.org/0000-0002-2087-5694
https://orcid.org/0000-0002-2890-3274
co.paredesu@uea.edu.ec
wcaicedo@uea.edu.ec
Ecuador, Puyo, Universidad Estatal Amazónica
Ecuador, Puyo, Universidad Estatal Amazónica
Autor de correspondencia
1
DOI / URL: https://doi.org/10.69484/rcz/v4/n3/131
Resumen: Los polifenoles constituyen un grupo de
compuestos bioactivos de notable importancia, que se
encuentran de forma generalizada en el reino vegetal.
En este estudio se optimizó la extracción con ultrasonido
de polifenoles totales en hojas de Psidium guajava
mediante la metodología de superficie de respuesta. La
concentración de polifenoles se determinó mediante el
método de Folin-Ciocalteu. Se evaluó el efecto de la
temperatura, tiempo y amplitud ultrasónica sobre la
extracción polifenoles mediante un diseño Box-
Behnken. Las condiciones óptimas de extracción se
determinaron mediante el análisis de superficies de
respuesta. El modelo cuadrático presentó el mejor
ajuste con valores de ajustado y predicho de 0,9927
y 0,9582 respectivamente. La temperatura, tiempo y
amplitud ejercieron un efecto significativo (p<0,05) y
positivo en el rendimiento de extracción. Las
condiciones óptimas de extracción que maximizaron el
contenido de polifenoles fueron: temperatura 46,55°C,
tiempo 28,12 minutos y amplitud ultrasónica 67,20%,
resultando en un contenido predicho de 1,76 g EAG/100
g. Estos resultados contribuyen a establecer
condiciones óptimas para la extracción de polifenoles, lo
cual es fundamental para aprovechar el potencial
nutracéutico y farmacológico de las hojas de Psidium
guajava.
Palabras clave: guayaba, extracción con ultrasonido,
modelos matemáticos
Recibido: 30/Jun/2025
Aceptado: 22/Jul/2025
Publicado: 30/Sep/2025
Cita: Viáfara-Banguera, D., Reyes-
Mera, J. J., Paredes-Ulloa, C. O., &
Caicedo-Quinche, W. O. (2025).
Optimización de la extracción de
polifenoles totales en hojas de Psidium
guajava. Revista Científica Zambos,
4(3), 67-79.
https://doi.org/10.69484/rcz/v4/n3/131
Ecuador, Santo Domingo, La
Concordia
Universidad Técnica Luis Vargas
Torres de Esmeraldas Sede Santo
Domingo
Revista Científica Zambos (RCZ)
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Abstract:
Polyphenols constitute a group of bioactive compounds of remarkable importance,
which are widely found in the plant kingdom. In this study, the ultrasound extraction of
total polyphenols in Psidium guajava leaves was optimized using response surface
methodology. The concentration of polyphenols was determined by the Folin-Ciocalteu
method. The effect of temperature, time and ultrasonic amplitude on polyphenol
extraction was evaluated using a Box-Behnken design. Optimal extraction conditions
were determined by response surface analysis. The quadratic model presented the
best fit with adjusted and predicted values of 0.9927 and 0.9582, respectively.
Temperature, time and amplitude exerted a significant (p<0.05) and positive effect on
extraction yield. The optimum extraction conditions that maximized polyphenol content
were: temperature 46.55°C, time 28.12 minutes and ultrasonic amplitude 67.20%,
resulting in a predicted content of 1.76 g EAG/100 g. These results contribute to
establish optimal conditions for the extraction of polyphenols, which is fundamental to
take advantage of the nutraceutical and pharmacological potential of Psidium guajava
leaves.
Keywords: guava, ultrasonic extraction, mathematical modeling.
1. Introducción
Los polifenoles constituyen un grupo de compuestos bioactivos de notable
importancia, que se encuentran de forma generalizada en el reino vegetal. Se
encuentran en frutas, verduras, hojas y semillas y son metabolitos secundarios que
desempeñan funciones importantes en las plantas ya que contribuyen a la defensa
contra patógenos y a la protección frente al estrés ambiental (Zagoskina et al., 2023).
Se ha demostrado que los polifenoles poseen actividades antimicrobianas,
antioxidantes y antiinflamatorias, destacándolos como compuestos de interés para la
investigación nutricional y farmacéutica (Iqbal et al., 2023).
El interés científico por los polifenoles ha aumentado significativamente en las últimas
décadas, principalmente por su contribución en la prevención de patologías crónicas.
Diversas investigaciones epidemiológicas indican que la ingesta regular de alimentos
con alto contenido de estos compuestos podría asociarse con una reducción en el
riesgo de desarrollar enfermedades cancerígenas, cardiovasculares y diabetes
(Vicente-Zurdo et al., 2024; Sahiner et al., 2022). Este supuesto potencial terapéutico,
unido a la creciente demanda de alternativas naturales a los nuevos compuestos
sintéticos disponibles en el mercado, ha contribuido al aumento de las investigaciones
sobre las fuentes vegetales ricas en polifenoles, así como de estrategias efectivas
para su extracción y para su aprovechamiento (Guamán-Rivera, 2022).
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Psidium guajava L. representa una de las especies vegetales que presenta cantidades
importantes de polifenoles, un árbol de la familia Myrtaceae, nativo de la América
tropical, pero que hoy día se cultiva en la mayoría de las regiones tropicales y
subtropicales del mundo (Patil et al., 2023; Guamán-Rivera & Flores-Mancheno,
2023). El fruto, es muy consumido, mientras que las hojas se han usado como
medicina popular para enfermedades como los trastornos gastrointestinales,
inflamaciones o procesos infecciosos (Ugbogu et al., 2022). Estos usos tradicionales
han sido respaldados por investigaciones científicas que han identificado en las hojas
de P. guajava una notable concentración de compuestos fenólicos, como flavonoides,
taninos y ácidos fenólicos, responsables en gran medida de sus efectos biológicos
(Ugbogu et al., 2022).
Sin embargo, para aprovechar adecuadamente el potencial de estos compuestos
bioactivos, es fundamental desarrollar métodos de extracción eficientes. Los
procedimientos convencionales, como la extracción Soxhlet o la maceración,
presentan diferentes limitaciones, dentro de las cuales están el uso prolongado de
solventes orgánicos, altos consumos energéticos y tiempos de procesamiento
extensos (Sridhar et al., 2021; Rojas & Saavedra-Mera, 2022). Además, estos
métodos pueden afectar la estabilidad de los compuestos termolábiles y no siempre
garantizan un rendimiento óptimo de extracción. Estas limitaciones han motivado la
búsqueda de técnicas alternativas que permitan obtener extractos con mayor
contenido de polifenoles totales de manera más eficiente y sostenible (Chaves et al.,
2020).
En esta línea, la extracción mediante ultrasonido es una tecnología bastante efectiva.
Este tipo de extracción se basa en el fenómeno física conocido como cavitación
acústica, que permite romper las paredes celulares vegetales facilitando de esta forma
la liberación de compuestos bioactivos en el disolvente (Hu et al., 2025). En
comparación a los métodos tradicionales de extracción, presenta ventajas como,
menor tiempo de extracción, un menor uso de disolventes y un mejor rendimiento de
los compuestos termolábiles (Yang et al., 2021). Sin embargo, la eficiencia del
procedimiento está condicionada por la optimización de distintas variables operativas:
potencia ultrasónica, tiempo de extracción, temperatura, relación sólido-líquido. El
presente estudio tuvo como objetivo optimizar la extracción con ultrasonido de
polifenoles totales de hojas de Psidium guajava mediante la metodología de superficie
de respuesta.
2. Metodología
2.1. Recolección y preparación de la muestra
Para el presente estudio, se recolectaron hojas maduras P. guajava en la ciudad de
Puyo (01°29'S, 78°00'W; altitud 950 msnm), provincia de Pastaza, Ecuador. Las
muestras se obtuvieron de árboles adultos cultivados en condiciones naturales sin
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aplicación de pesticidas. Se procedió al lavado de las hojas con agua potable para
eliminar posibles contaminantes y se dejaron secar a temperatura ambiente (25 ±
2°C). Luego, se realizó un secado en estufa a 40 °C durante 72 h. El contenido de
humedad se determinó por diferencia de peso, según Reyes-Mera et al. (2024). Este
resultado se utilizó para expresar la concentración de polifenoles totales en base a
biomasa seca. Las hojas secas se pulverizaron y fueron tamizadas hasta obtener un
diámetro de partícula inferior a 0,5 mm.
2.2. Extracción de polifenoles totales
Se aplicó la técnica de extracción con ultrasonido mediante un equipo de baño
termostático. Se utilizó agua destilada como disolvente en una relación sólido-líquido
de 1:10 (m/v). Las extracciones se realizaron según las condiciones establecidas en
el diseño experimental. Los extractos acuosos se filtraron usando papel Whatman N°
4 y el contenido de polifenoles se analizó de inmediato.
2.3. Cuantificación de polifenoles totales
Se aplicó la metodología descrita por Luna-Fox et al. (2025). Se usó una curva de
calibración preparada con ácido gálico (Ecuación 1) para el cálculo de polifenoles
(expresados en gramos equivalentes de ácido gálico por cada 100 g de biomasa seca
(g EAG/100 g).
A=0,0734C−0,0028
Donde: C de la concentración de polifenoles totales (mg/L) y A la absorbancia.
2.4. Diseño experimental
Se eestudió el efecto de la temperatura, tiempo y amplitud sobre la extracción de
polifenoles en las hojas de P. guajava. Estos factores se optimizaron mediante un
diseño tipo Box-Behnken (Tabla 1) conformado por 16 experimentos. Las condiciones
más favorables de extracción se encontraron mediante el análisis de gráficas de
contorno y de superficie de respuesta. Los resultados experimentales se ajustaron a
un modelo cuadrático (Ecuación 2) mediante el software Design Expert versión
13.0.5.0 (versión de prueba, Stat-Ease Inc., Minneapolis, MN, EE. UU.).









Donde indica la respuesta estimada, β0, βii y βij los coeficientes de regresión medio,
lineal, y cuadrático, respectivamente.
Tabla 1
Niveles codificados de las variables independientes
Variable de estudio
Código
Bajo (-1)
Central (0)
Alto (1)
Temperatura (°C)
X1
30
40
50
Tiempo (min)
X2
10
20
30
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Variable de estudio
Código
Bajo (-1)
Central (0)
Alto (1)
Amplitud ultrasónica (%)
X3
20
45
70
Nota: (Autores, 2025).
2.5. Validación del modelo
Se realizó mediante el análisis de los coeficientes de R
2
ajustado y R
2
predicho
correspondientes a los resultados experimentales y previstos por el modelo de
superficie de respuesta. Se aplicó un análisis de varianza (ANOVA) para evaluar la
significancia estadística (p<0,05) de los términos del modelo.
3. Resultados
El software Design Expert, generó tres modelos predictivos para la extracción de
polifenoles totales en P. guajava. Los mejores resultados se obtuvieron con el
polinomio cuadrático (Tabla 2), el cual presentó los mejores ajustes: p-valor <0,0001,
p-valor de falta de ajuste de 0,0607, ajustado de 0,9927 y predicho de 0,9582.
Considerando que un P-valor de falta de ajuste <0,05 indica significancia estadística,
los resultados obtenidos para los modelos lineal y 2FI, mostraron que no fueron
apropiados para predecir la variabilidad del contenido polifenólico en las hojas de P.
guajava. Esto se debe a que estos modelos presentaron una falta de ajuste
significativa (p > 0,05), lo que indica que no son estadísticamente válidos para explicar
la relación entre las variables independientes (temperatura (X
1
), tiempo (X
2
) y amplitud
ultrasónica (X
3
)) y la extracción de polifenoles.
Tabla 2
Resumen de los modelos matemáticos propuestos por el software Design Expert
Modelo
p-valor
Falta de ajsute p-valor
R² ajustado
R² predicho
Lineal
0,0038
0,0016
0,8851
0,8070
2FI
0,0052
0,0068
0,9603
0,8821
Cuadrático
<0,0001
0,0607
0,9927
0,9582
Sugerido
Nota: (Autores, 2025).
Los factores de estudio (X
1
, X
2
y X
3
) fueron estadísticamente significativos (Tabla 3)
con p-valores menores a 0,0001 en todos los casos. Además, se observó un efecto
positivo de estas variables, mostrando que a niveles más altos de cada factor la
respuesta experimental aumentó de manera proporcional (Figura 1). Por otro lado, las
interacciones entre factores también fueron significativas (p<0,05), al igual que los
términos cuadráticos (X
2
2
y X
2
3
). Sin embargo, el término X
1
2
no mostró un efecto
significativo en la extracción de polifenoles, por lo tanto, no fue considerado en el
modelo cuadrático con el fin de mejorar el ajuste. El coeficiente de variación (CV) para
los resultados de polifenoles fue de 3,13%.
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Tabla 3
ANOVA para el modelo seleccionado
Polifenoles
Suma de
cuadrados
gl
Cuadrados
medios
F-valor
p-valor
Modelo
2.09
8
0.2610
297.95
< 0.0001
significativo
X
1
- Temperatura
1.07
1
1.07
1216.82
< 0.0001
X
2
-Tiempo
0.5618
1
0.5618
641.40
< 0.0001
X
3
-Amplitud
0.2738
1
0.2738
312.60
< 0.0001
X
1
X
2
0.0625
1
0.0625
71.36
< 0.0001
X
1
X
3
0.0361
1
0.0361
41.22
0.0004
X
2
X
3
0.0441
1
0.0441
50.35
0.0002
X
2
2
0.0352
1
0.0352
40.14
0.0004
X
2
3
0.0086
1
0.0086
9.77
0.0167
Residual
0.0061
7
0.0009
Error puro
0.0007
3
0.0002
R
2
0,997
%CV
3,13
Nota: (Autores, 2025).
Figura 1
Temperatura
Nota: (Autores, 2025).
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Figura 2
Tiempo
Nota: (Autores, 2025).
Figura 3
Amplitud ultrasónica
Nota: (Autores, 2025).
El modelo cuadrático en términos de factores reales fue el siguiente:
0,48-0,006X
1
-0,005X
2
-0,02X
3
+0,001X
1
X
2
+0,0004X
1
X
3
+0,0004X
2
X
3
-
0,0009X
2
2
+0,00007X
2
3
Donde Y representa la concentración de polifenoles totales (g EAG/100 g), X
1
es la
temperatura (°C), X
2
el tiempo (min) y X
3
la amplitud ultrasónica (%).
Esta ecuación no es válida para el análisis de efectos relativos, ya que los coeficientes
presentan escalamiento heterogéneo por las unidades originales de cada factor, y el
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intercepto no se encuentra en el centro del espacio experimental, lo que impide la
comparación directa de la magnitud de los parámetros estimados.
La Figura 4 presenta los valores predichos por el modelo cuadrático frente a los
valores experimentales de polifenoles totales en hojas de P. guajava. La distribución
de los puntos sobre la recta muestra una buena concordancia entre los valores
predichos y los observados experimentalmente. Esta estrecha alineación, junto con la
ausencia de patrones sistemáticos en la dispersión de los puntos, confirma
visualmente el buen ajuste del modelo cuadrático a los datos. Los resultados de
polifenoles totales variaron entre 0,39 a 1,69 g EAG/100 g.
Figura 4
Comparación de los resultados experimentales de polifenoles (g EAG/100 g) contra
los predichos por el modelo cuadrático.
Nota: (Autores, 2025).
La figura 5 muestra las superficies de respuesta tridimensionales (A) y gráficos de
contorno (B) generadas a partir del modelo cuadrático, las cuales ilustran el efecto
combinado de los factores de extracción (X
1
, X
2
y X
3
) sobre la concentración de
polifenoles totales. El color de la superficie varía desde azul (bajas concentraciones,
0,39) hasta rojo (altas concentraciones, 1,69), permitiendo visualizar las zonas de
máxima extracción. Se observa que el aumento de X
1
, X
2
y X
3
favorecen un
incremento en la concentración de polifenoles. El análisis de metodología de superficie
de respuesta reveló que las condiciones óptimas para maximizar la extracción de
polifenoles se alcanzaron con 46,55°C, 28,12 min y 67,20% de amplitud, obteniéndose
bajo estas condiciones un contenido predicho de polifenoles de 1,76 g EAG/100 g.
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Figura 5
Gráficos tridimensionales
Nota: (A) y de contorno (B) para el análisis de los niveles óptimos de X
1
: temperatura (°C); X
2
: tiempo
(min) y X
3
:
amplitud ultrasónica (%) para maximizar la extracción de Y: polifenoles totales (g EAG/100
g) en los extractos acuosos de P. guajava (Autores, 2025).
4. Discusión
En este estudio se encontró que el modelo cuadrático presentó los mejores ajustes
(R2 experimental y predicho >0,90) para predecir la concentración de polifenoles en
hojas de P. guajava. El ajustado cuantifica la variabilidad explicada por el modelo
en los datos de experimentales. Valores cercanos a 1 indican una buena capacidad
explicativa. Por otro lado, el predicho evalúa el rendimiento del modelo con datos
independientes no utilizados en el ajuste. Cuando ambos valores son cercanos y altos,
se confirma que el modelo es robusto, tanto en ajuste como en capacidad predictiva.
La diferencia menor a 0,2 entre ambos valores es un criterio aceptado en modelado
estadístico para considerar que el modelo no está sobreajustado y es confiable para
predicciones futuras (Arteaga-Crespo et al., 2020).
Estudios previos sobre extracción y predicción de polifenoles en matrices vegetales
han utilizado metodologías similares, como la Metodología de Superficie de
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Respuesta (MSR), para optimizar y modelar procesos de extracción. Por ejemplo, se
ha encontrado que los modelos cuadráticos desarrollados mediante MSR muestran
una alta concordancia entre los valores experimentales y predichos, con variaciones
inferiores a 5%, lo que respalda la validez y precisión de estos modelos para predecir
la concentración de polifenoles bajo diferentes condiciones de extracción (Gutierrez-
Montiel et al., 2024; Thi et al., 2024).
Los factores de estudio: temperatura, tiempo y amplitud ultrasónica mostraron un
efecto positivo y significativo sobre la extracción de polifenoles en hojas de P. guajava.
Esto puede explicarse debido a que, el incremento de la temperatura y el tiempo
favorece la solubilización y difusión de los polifenoles desde la matriz vegetal hacia el
disolvente. Por otro lado, mayores niveles de amplitud ultrasónica incrementan la
cavitación, lo que rompe las paredes celulares y facilita la liberación de los compuestos
fenólicos. Por ejemplo, se ha informado que condiciones de 63 °C, 38 min y alta
potencia ultrasónica maximizan la extracción de polifenoles, logrando valores de 5,98
g GAE/g (Zeng et al., 2020). Además, la interacción entre estos factores mejora la
eficiencia del proceso, consiguiendo extractos con elevada actividad antioxidante y
concentración de compuestos bioactivos (Tena-Rojas et al., 2022).
Estudios recientes confirman que la extracción de compuestos químicos con
ultrasonido es más efectiva que métodos tradicionales, ya que la combinación de
parámetros como la temperatura, tiempo y amplitud no solo mejora el rendimiento,
sino que también aumenta la actividad antioxidante de los extractos (Ilmu et al., 2019).
La explicación radica en que el ultrasonido genera microburbujas que colapsan y
provocan la disrupción de las células, liberando más polifenoles, mientras que la
temperatura y el tiempo adecuado evitan la degradación de estos compuestos y
favorecen su transferencia al disolvente. Por lo tanto, la optimización de estos
parámetros es importante para obtener extractos con mayor potencial funcional y
antioxidante.
La concentración de polifenoles (0,39 - 1,69 g EAG/100 g) reportada en este estudio,
se encuentra dentro del intervalo informado previamente en la literatura. Por ejemplo,
investigaciones recientes han encontrado valores de 1,6 a 15,2 g EAG/100 g,
dependiendo de las condiciones de extracción y el tipo de disolvente empleado
(Gutierrez-Montiel et al., 2024; Thi et al., 2024). Además, otros trabajos han reportado
valores intermedia (5,75 g EAG/100 g) empleando mezclas de metanol-cloroformo
(Bilal et al., 2024). Estas diferencias reflejan la diversidad de metodologías y
condiciones experimentales empleadas en la cuantificación de polifenoles. Las
diferencias en los resultados pueden atribuirse principalmente a factores como el
método de extracción, el tipo y concentración del solvente, el tiempo y la temperatura
de extracción, así como la proporción sólido-líquido empleada (Nguyen et al., 2023).
Asimismo, la variedad botánica, el estado de madurez de las hojas, la época de
cosecha y las condiciones ambientales influyen significativamente en el contenido de
polifenoles (Durán-Castañeda et al., 2023).
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5. Conclusiones
En este estudio el modelo cuadrático optimizado fue efectivo para predecir la
concentración de polifenoles totales en hojas de Psidium guajava, demostrando un
buen ajuste y capacidad predictiva con altos valores de ajustado (0,9937) y R²
predicho (0,9729). Además, se demostró que la temperatura, el tiempo y la amplitud
ultrasónica fueron factores significativos con un efecto positivo en la extracción de
polifenoles.
Las mejores condiciones de extracción obtenidas mediante el análisis de gráficos de
superficie de respuesta fueron: temperatura 46,55°C, tiempo 28,12 minutos y amplitud
ultrasónica 67,20%, lo que resultó en un contenido predicho de polifenoles de 1,76 g
EAG/100 g. Este estudio contribuye a establecer condiciones óptimas para la
extracción de polifenoles en hojas de Psidium guajava, lo cual es fundamental para el
aprovechamiento de su potencial nutracéutico y farmacológico.
CONFLICTO DE INTERESES
“Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses”.
Referencias Bibliográficas
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